右美托咪定对小鼠脑缺血再灌注后神经再生的影响:脑组织TGF-β1在其中的作用

摘要

目的评价右美托咪定对小鼠脑缺血再灌注后神经再生的影响及脑组织转化生长因子β1（TGF-β1）在其中的作用。方法 SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠60只,体重23～25g,8～10周龄,采用随机数字表法分为5组（n=12）:假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、右美托咪定组（D组）、右美托咪定+IgG1同型对照单克隆抗体组（DI组）和右美托咪定+TGF-β1单克隆中和抗体组（DA组）。采用大脑中动脉栓塞法制备小鼠脑缺血再灌注损伤模型。D组于再灌注14 d开始腹腔注射右美托咪定50μg/kg,间隔24 h,共14 d;DA组和DI组于腹腔注射右美托咪定前30 min时分别腹腔注射TGF-β1单克隆中和抗体20μg或其IgG1同型对照单克隆抗体20μg。再灌注27 d时腹腔注射5-溴脱氧尿苷（Brd U）100 mg/kg,间隔8 h再腹腔注射1次。于BrdU第2次给药结束后16 h时行强迫游泳实验、蔗糖摄取实验和旷场实验。行为学测定结束后,采用免疫组化法检测缺血侧脑室下区肿瘤增殖抗原（Ki67）、BrdU和BrdU/双皮质素（DCX）的阳性细胞数;分别采用Western blot法和RT-PCR法检测缺血脑组织TGF-β1及其mRNA的表达水平。结果与Sham组比较,I/R组绝望漂浮状态时间延长,中央区停留时间百分比和蔗糖水摄取量降低,Ki67、BrdU和BrdU/DCX的阳性细胞数增多,TGF-β1及其mRNA表达上调（P＜0.05或0.01）;与I/R组比较,D组绝望漂浮状态时间缩短,中央区停留时间百分比和蔗糖溶液摄取量升高,Ki67、BrdU和BrdU/DCX的阳性细胞数增多,TGF-β1及其mRNA表达上调（P＜0.05或0.01）;与D组比较,DA组绝望漂浮状态时间延长,中央区停留时间百分比和蔗糖溶液摄取量降低,Ki67、BrdU和BrdU/DCX的阳性细胞数减少（P＜0.05）,DI组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）。结论右美托咪定可缓解小鼠脑缺血再灌注后抑郁和焦虑,进而促进神经再生,其机制与上调脑组织TGF-β1表达有关。