新生大鼠下丘脑神经元原代培养及形态学

摘要

目的:优化下丘脑神经元体外培养方法,观察神经元形态学特点及生长规律.方法:取SD新生鼠,剥离下丘脑,机械吹打法制成单细胞悬液,接种,24 h后换为Neurobasal培养基;神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫细胞化学法计数阳性细胞;H-E染色、Nissl染色.结果:原代培养神经元6～8 h内开始贴壁,培养5～7 d突起增粗增长,连接成网,以多极神经元为主,胞体呈三角形、梭形、椭圆形;经NSE鉴定为神经元并且纯度约90％;细胞核大而圆,H-E染色胞核深蓝色,胞质红色,胞体可见尼氏颗粒.结论:改良后培养下丘脑的方法具有稳定的可重复性,可应用于下丘脑神经元培养实验及建立神经毒性研究模型.