血清中胆汁酸的高效液相色谱荧光测定及质谱鉴定

摘要

在Hypersil C18色谱柱上,利用新型荧光试剂1,2-苯并-3,4-二氢咔唑-9-乙基对甲苯磺酸酯(BDETS)作柱前衍生化试剂,采用梯度洗脱对10种胆汁酸(BAs)荧光衍生物进行了优化分离.95℃下在二甲基亚砜溶剂中以柠檬酸钾作催化剂,衍生反应30 min后获得稳定的荧光产物,衍生反应完全.激发和发射波长分别为λex=333 nm,λem=390 nm.采用大气压化学电离源(APCI)正离子模式,实现了血清中胆汁酸的定性和定量测定.线性回归系数均在0.9996以上,线性范围宽,检出限为12.94～21.94 fmol.