血管紧张素Ⅱ对增生性瘢痕成纤维细胞细胞外信号调节激酶活性的影响

摘要

目的:本研究明观察血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)对增生性瘢痕成纤维细胞细胞外信号调节激酶(extracellular Signal-regulated kinase,ERK)活性的影响,旨在探讨其影响增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为的信号机制.方法:取自愿捐献的增生性瘢痕组织标本,采用胶原酶法行成纤维细胞培养.用免疫荧光组织化学法检测细胞AT1和AT2受体的表达.取第3～4代细胞,并按实验设计,分别加入10-7mol/L Ang Ⅱ,10-7mol/L Ang Ⅱ+10 μmol/L Valsartan,10-7mol/L Ang Ⅱ +10μmol/L PD123319,10μmol/L Valsartan,10μmol/L PD123319共5组;对照组仅加入等量DMEM.以Western Blot法检测培养的细胞细胞外信号调节激酶(extracellular Signal-regulated kinases,ERK)活性变化,观察在阻断AT1或AT2受体情况下Ang Ⅱ对培养的瘢痕成纤维细胞ERK磷酸化的影响.结果:免疫荧光组织化学染色结果显示培养的增生性瘢痕成纤维细胞同表达AT1和AT2受体.Ang Ⅱ可增加培养的增生性瘢痕成纤维细胞ERK磷酸化.在一定剂量范围内,Ang Ⅱ浓度增加,细胞ERK磷酸化程度增加.与对照组比较10-7mol/L Ang Ⅱ显著增加瘢痕成纤维细胞ERK磷酸化,且差异有统计学意义(P＜0.05).10μmol/L AT2受体拮抗剂PD1233191可显著增强Ang Ⅱ诱导的细胞ERK磷酸化(P＜0.05);10μmol/L的AT1受体拮抗剂Valsartan可显著抑制Ang Ⅱ诱导的细胞ERK磷酸化;Valsartan或PD1233191单独刺激细胞并未明显影响ERK磷酸化(P＞0.05).应用抗ERK抗体显示各组ERK含量一致.结论:Ang Ⅱ通过其受体AT1和AT2可调控增生性瘢痕成纤维细胞ERK磷酸化,Ang Ⅱ对增生性瘢痕成纤维细胞ERK活性的影响可能是Ang Ⅱ调控增生性瘢痕成纤维细胞生物学行为可能的信号机制之一.