Pl3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路在体外培养血管瘤血管内皮细胞中的表达

摘要

目的:探讨PI3K/AKT/mTOR/4EBP1信号通路在体外培养血管瘤血管内皮细胞中的表达情况.方法:血管瘤标本取自男患儿腹壁血管瘤,经过胰酶处理后进行血管瘤内皮细胞的原代培养,选择培养至对数生长期的细胞进行同步化,接着分为雷帕霉素组和阴性对照组,雷帕霉素组细胞1640培养液中加入10 nmol/L雷帕霉素.选择Western blot法分析PI3K、AKT、mTOR及4EBP1等蛋白在血管瘤内皮细胞体外培养中的水平,细胞细胞周期及凋亡的的情况选择流式细胞计数仪进行相应检查.结果:通过流式细胞仪检查经过24 h处理的两组细胞凋亡情况,结果显示阴性对照组为1.27±0.25,雷帕霉素组为4.85±0.47,两组间对比差异有统计学意义(t=5.273,P<0.05).且经雷帕霉素干预血管瘤内皮细胞24 h后,G0/G1期血管瘤内皮细胞比例相较于阴性对照组升高显著,差异有统计学意义(t=3.964,P<0.05).同阴性对照组相比,血管瘤血管内皮细胞经雷帕霉素作用后PI3K、AKT、mTOR及4EBP1蛋白表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:PI3K、AKT、mTOR及4EBP1蛋白在血管瘤内皮细胞体外培养过程中均存在一定的表达情况;选择雷帕霉素干预mTOR/4EBP1信号通路可导致细胞周期停止于G0/G1期而促进细胞凋亡.