桑根皮素调控Wnt/β-catenin信号通路影响胶质瘤U251细胞增殖的实验研究

摘要

目的 探讨桑根皮素调控Wnt/β-catenin信号通路对脑胶质瘤U251细胞增殖的影响.方法 体外培养人脑胶质瘤细胞U87,采用不同浓度桑根皮素(1、5、25、50、100μmol/L)作用于U87细胞,分别采用MTT法、细胞集落形成法、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡活性.采用Western blotting法和细胞免疫荧光法检测Wnt-5a、β-catenin、糖原合酶激酶3β(GSK3β)、BIRC5(survivin)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)表达情况以及β-catenin的核转位情况.结果 基于网络药理学分析,Wnt/β-catenin信号通路是桑根皮素治疗脑胶质瘤的关键通路.桑根皮素呈剂量依赖方式和时间依赖方式抑制U87细胞的增殖.1、5、25、50、100μmol/L桑根皮素处理后,U87细胞集落形成数[(421±33)个、(380±41)个、(305±34)个、(207±56)个、(147±49)个]较空白对照组[(450±33)个]减少(P<0.001);细胞凋亡率[(12.76±1.18)％、(18.45±1.31)％、(25.02±1.69)％、(27.41±2.31)％、(38.16±2.19)％]较空白对照组[(2.18±0.19)％]增加(P<0.001).桑根皮素可降低U87细胞中Wnt-5a、β-catenin、BIRC5、GSK3β蛋白表达量,同时上调BAX蛋白的表达;并且经细胞免疫荧光分析,桑根皮素可抑制β-catenin核转位.结论 桑根皮素可能通过调节Wnt/β-catenin信号通路抑制U87细胞增殖,其作用机制可能为抑制β-catenin由胞浆向细胞核内转位,从而下调BIRC5表达并上调BAX表达.