南蛇藤影响胃癌细胞丝氨酸/甘氨酸代谢和增殖的作用机制研究

摘要

目的 探讨南蛇藤茎醋酸乙酯提取物(COE)通过提高丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)琥珀酰化水平影响胃癌细胞增殖、凋亡和丝氨酸/甘氨酸代谢的作用.方法 采用MTT法、TUNEL试剂盒检测COE对MGC-803细胞增殖和凋亡的影响.通过免疫沉淀富集MGC-803细胞中SHMT2蛋白,利用琥珀酰化泛抗体检测SHMT2琥珀酰化修饰水平.将细胞裂解液进行1H-NMR检测,结合多元统计分析比较阴性对照组和320μg/ml COE组丝氨酸/甘氨酸含量差异.结果 MTT法结果显示,20、40、80、160、320μg/ml COE分别处理MGC-803细胞24、48、72 h后,细胞的增殖活性受到明显抑制,并呈浓度和时间依赖性.经COE作用后,细胞核固缩,胞浆浓缩,胞膜破裂,出现凋亡小体,随着COE作用浓度升高,细胞凋亡明显.320μg/ml COE组细胞琥珀酰化SHMT2蛋白表达量高于阴性对照组(0.92±0.10 vs.0.18±0.05,P<0.05).阴性对照组和320μg/ml COE组细胞丝氨酸(7.861±0.367 vs.2.594±0.037)和甘氨酸(12.915±0.581 vs.4.620±0.382)含量差异具有统计学意义(P<0.05).结论 COE可通过影响胃癌细胞MGC-803丝氨酸/甘氨酸代谢,抑制其增殖,并诱导其凋亡,其可能的作用机制与上调丝氨酸代谢关键酶SHMT2的琥珀酰化水平有关.