胃癌间充质干细胞、己糖激酶2对胃癌细胞株HGC-27增殖迁移及葡萄糖代谢能力的调控作用观察

摘要

目的 观察胃癌间充质干细胞(GCMSCs)、己糖激酶2(HK2)对胃癌细胞株HGC-27增殖、迁移及葡萄糖代谢能力的调控作用.方法 取对数生长期HGC-27细胞分为4组,GCMSC-CM组加入GCMSCs条件培养基(GCMSC-CM)培养,siHK2组转染HK2小干扰RNA(siHK2),siHK2+GCMSC-CM组转染siHK2后再加入GCMSCs条件培养基培养,对照组加入含10％FBS的RPMI 1640营养液培养,各组细胞继续培养48 h后,采用Western Blotting法检测各组细胞中HK2蛋白,采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力(以OD值表示),采用Transwell实验检测各组细胞迁移能力(以迁移细胞数表示),使用己糖激酶法和半自动生化分析仪检测各组细胞培养上清中葡萄糖,采用乳酸检测试剂盒检测细胞培养上清中的乳酸.结果 对照组、GCMSC-CM组、siHK2组、siHK2+GCMSC-CM组细胞中HK2蛋白相对表达量分别为0.27±0.02、0.56±0.03、0.13±0.01、0.14±0.01,其中siHK2组与siHK2+GCMSC-CM组细胞中HK2蛋白相对表达量相比,P>0.05,其余组间相比,P均<0.05.对照组、GCMSC-CM组、siHK2组、siHK2+GCMSC-CM组OD值分别为0.56±0.08、0.80±0.09、0.27±0.05、0.32±0.01,其中siHK2组与siHK2+GCMSC-CM组OD值相比,P>0.05,其余组间相比,P均<0.05.对照组、GCMSC-CM组、siHK2组、siHK2+GCMSC-CM组迁移细胞数分别为(39.00±3.46)、(82.33±2.96)、(14.00±2.52)、(18.33±3.76)个,其中siHK2组与siHK2+GCMSC-CM组迁移细胞数相比,P>0.05,其余组间相比,P均<0.05.对照组、GCMSC-CM组、siHK2组、siHK2+GCMSC-CM组葡萄糖吸收量分别为(4.65±0.24)、(7.30±0.48)、(3.13±0.25)、(3.20±0.15)mmol/L,其中siHK2组与siHK2+GCMSC-CM组葡萄糖吸收量相比,P>0.05,其余组间相比,P均<0.05.对照组、GCMSC-CM组、siHK2组、siHK2+GCMSC-CM组乳酸含量分别为(7.38±0.39)、(11.34±0.69)、(5.17±0.30)、(5.27±0.16)mmol/L,其中siHK2组与siHK2+GCMSC-CM组乳酸含量相比,P>0.05,其余组间相比,P均<0.05.结论 加入GCMSC-CM可提高HGC-27细胞的增殖迁移及葡萄糖代谢能力,下调HK2表达可抑制HGC-27细胞的增殖迁移及葡萄糖代谢能力.