miR-572对胃癌细胞增殖和凋亡影响及其作用机制研究

摘要

目的 研究miR-572对胃癌细胞增殖、凋亡的影响和机制.方法 Real-time PCR方法 测定miR-572在胃癌细胞和正常胃黏膜细胞中的表达差异.胃癌细胞NCI-N87中转染miR-572 inhibitor,MTT测定细胞增殖,PI单染法测定细胞周期分布,Annexin V-FITC/PI法测定细胞凋亡变化,Western blot检测细胞周期依赖性蛋白激酶4(CDK4)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达.在线靶基因预测软件发现含WW域的氧化还原酶(WWOX)可能为miR-572的靶基因,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系.将WWOX siRNA和miR-572 inhibitor共转染到胃癌细胞中,利用上述方法 测定细胞增殖、周期和凋亡变化.结果 miR-572在胃癌细胞中的表达水平明显高于正常胃黏膜细胞.miR-572 inhibitor转染后的胃癌细胞增殖能力下降,细胞G1期比例升高,细胞凋亡率升高,细胞中CDK4、Bcl-2蛋白表达减少,p21、Bax蛋白表达增多.miR-572靶向负调控WWOX蛋白表达.WWOX siRNA可以逆转miR-572 inhibitor对胃癌细胞增殖抑制、周期阻滞和凋亡促进作用.结论 下调miR-572靶向负调控WWOX抑制胃癌细胞增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡.