miR-375与胃肠间质瘤细胞伊马替尼敏感性关系的实验研究

摘要

目的 探讨miR-375与胃肠间质瘤细胞对伊马替尼敏感性的关系以及可能的作用机制.方法 收集2017年1月至2018年2月在河南省肿瘤医院病理科存档的石蜡包埋45例胃肠间质瘤(GIST)组织标本和对应的癌旁正常胃黏膜组织标本.向GIST-T1细胞中分别转染miR-375 mimics(转染组)或空质粒(阴性对照组),采用MTY法和流式细胞术检测两组细胞增殖和凋亡活性.采用荧光定量PCR法(QPCR)分别检测GIST组织中miR-375水平和GIST-T1细胞中miR-375、p-VEGFR2、p-Akt、PTEN表达水平.结果 GIST组织和癌旁正常黏膜组织中miR-375水平分别为0.673±0.078和1.000±0.101,差异有统计学意义(P＜0.05).13例GIST组织中miR-375表达呈阳性,阳性表达率为28.9％.经不同浓度伊马替尼(2、5、10 μmol/L)处理后,转染组细胞增殖抑制率和凋亡率分别为(24.51±2.10)％、(52.39±4.23)％、(84.57±4.64)％和(17.95±3.66)％、(35.42±3.57)％、(63.47±3.24)％,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).经6.13 μmol/L伊马替尼作用后,GIST-T1细胞miR-375表达量为2.439±0.056,显著高于未经伊马替尼处理的1.000±0.037,差异有统计学意义(P＜0.05).经miR-375 mimics转染后,GIST-T1细胞中p-VEGFR2和p-Akt表达水平分别为2.12±0.07、1.82±0.09,明显高于阴性对照组,而PTEN mRNA表达水平为0.45±0.12,显著低于阴性对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).miR-375与p-VEG-FR2、p-Akt mRNA表达水平呈正相关性(r=0.689,0.465,P＜0.05),与PTEN mRNA呈负相关性(r=-0.523,P＜0.05).结论 上调miR-375可增加VEGFR-2和Akt磷酸化水平,从而提高GIST细胞对伊马替尼的敏感性.