Establishment of imatinib-resistant gastrointestinal stromal tumor cell subline and investigation of its sensitivity to the chemomotherapeutic agents

摘要

Цель. Получить клон иматиниб-резистентных клеток гастроинтестинальных стромальных опухолей (ГИСО) и оценить его чувствительность к химиопрепаратам различных групп. Методы. Для получения иматиниб-резистентного клона опухолевые клетки линии ГИСО Т1 культивировали в присутствии постепенно увеличивающихся доз иматиниба в течение 18 мес. Каждые 3 мес проводили сравнительную оценку чувствительности клеток ГИСО Т1 к иматинибу с помощью колориметрического MTS-теста. Уровень экспрессии белков, служащих маркёрами апоптоза, оценивали методом иммуноблоттинга с использованием соответствующих моноклональных антител. После получения клона клеток ГИСО Т1 с признаками резистентности к таргетному препарату иматинибу оценивали его чувствительность к химиопрепаратам различных групп (доксорубицину, этопозиду, винбластину, паклитакселу, цисплатину). Чувствительность иматиниб-резистентных клеток ГИСО Т1 к химиопрепаратам, а также уровень экспрессии белков, служащих маркёрами апоптоза, оценивали с помощью колориметрического MTS-теста и методом иммуноблоттинга. Результаты. Через 18 мес культивирования клеток ГИСО Т1 в присутствии постепенно возрастающих концентраций иматиниба в клетках были обнаружены признаки резистентности к данному препарату. Полученный субклон опухолевых клеток ГИСО T1-IM-108R был чувствителен ко всем использованным химиопрепаратам. Наибольший цитостатический эффект в отношении иматиниб-резистентных клеток ГИСО T1-IM-108R был обнаружен у доксорубицина, винбластина и этопозида. Вывод. Иматиниб-резистентные клетки ГИСО Т1 обладают чувствительностью к химиопрепаратам различных групп; полученный субклон клеток ГИСО T1-IM-108R может быть использован при проведении скрининга наиболее эффективных в отношении ГИСО химиопрепаратов и вновь синтезированных соединений.