三氧化二砷对骨肉瘤细胞株MG63/dox多药耐药的逆转作用及其机制

摘要

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对骨肉瘤阿霉素(ADM)耐药细胞株MG63/dox的逆转作用及其机制.方法 采用不同浓度ADM(1～1000ng/ml)和As2O3(0.25～16 μmol/L)分别单独作用于MG63和MG63/dox细胞48 h,并选取2μmol/L As2O3联合不同浓度ADM(1～1000 ng/ml)作用于MG63/dox细胞24、48、72 h,同时设不加任何药物处理的对照组.应用CCK-8法检测两种药物对MG63和MG63/dox细胞增殖的影响,流式细胞术检测2μmol/L As2O3、200 ng/ml ADM单独或联合处理48 h后MG63/dox细胞的周期分布和凋亡率,蛋白免疫印迹法检测2μmol/L As2O3、200 ng/mlADM单独或联合处理48 h后MG63/dox细胞中P-gp、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果 As2O3和ADM单药作用于MG63/dox细胞48 h,细胞增殖均未受到影响;4、8、16 μmol/L As2O3和100、200、400、500、1000ng/mlADM分别作用于MG63细胞48 h,细胞增殖明显受到抑制(P＜0.05).As2O3联合ADM抑制MG63/dox细胞增殖的作用明显高于ADM单药组和对照组(P＜0.05),且抑制作用呈时间依赖性.与对照组相比,两药联合处理组的细胞凋亡率升高,Go/G1期细胞比例降低,G2/M期细胞比例升高,以上差异均有统计学意义(P＜0.05).两药联合处理组MG63/dox细胞中Bax蛋白表达水平明显升高,而P-gp和Bcl-2蛋白表达水平明显降低,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 As2O3联合ADM能够抑制骨肉瘤耐药细胞MG63/dox的增殖,这一作用可能与诱导细胞凋亡、上调Bax表达以及下调P-gp和Bcl-2表达有关.