怀山药种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生

摘要

通过对怀山药(Discorea opposita)种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生进行研究,结果表明:将低温下锻炼7天的怀山药试管苗带芽茎段放入预培养基中,低温下培养3天,然后在室温下用3%的海藻酸钠和0.5 mol·L-1 CaCl2包埋,包埋珠用MS+0.2 mol·L-1蔗糖+2 mol·L-1 甘油+50 g·L-1二甲基亚砜在0°C下装载60分钟,用30%甘油+15%乙二醇+10%二甲基亚砜+15%聚乙二醇+0.4 mol·L-1蔗糖在0°C下脱水60分钟,迅速投入液氮,24小时后立即用40°C水浴快速化冻,再用MS+0.5 mol·L-1蔗糖溶液洗涤2次,转入再生培养基中培养,可获得再生植株.再生植株成活率因基因型而异,铁棍山药、太谷山药、怀庆1号山药和B号山药的成活率分别为64.29%、49.21%、13.11%和39.81%.