黄瓜子多糖的分离、纯化和体外抗氧化活性研究

摘要

目的:对黄瓜子多糖进行分离、纯化,并考察其体外抗氧化活性.方法:采用水提醇沉法提取黄瓜子粗多糖(CCL),然后以Amberlite FPA90Cl阴离子和Amberlite FPC3500H阳离子串联交换树脂柱和离子交换纤维素DEAE Cellulose 52柱对CCL进行分离、纯化得到CCL-M2、CCL-M3、CCL-M6等3种多糖.结合高效液相色谱-蒸发光散射法、超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱法和紫外、红外光谱等多种技术对3种均一多糖的纯度、分子量、结构和单糖组成等进行分析.以维生素C(VC)为阳性对照,考察CCL-M2、CCL-M3、CCL-M6(质量浓度均为0.4、0.8、1.2、1.6、2.0 mg/mL)对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)的清除能力,并计算其半数清除浓度(IC50).结果:CCL-M2、CCL-M3、CCL-M6均为吡喃糖形式的均一多糖,分子量分别为9.614×106、2.024×107、3.343×107 Da.CCL-M2的单糖组成为鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,其摩尔比为5.1:2.6:1.7:1.4:31.6;CCL-M3和CCL-M6的单糖组成均为甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,其摩尔比分别为1.7:3.8:6.4:3.3:1.3和1.3:3.0:3.2:4.4:8.9.体外抗氧化活性结果显示,3种均一多糖对DPPH·、·OH、O2-·均具有一定的清除活性,其对DPPH·的清除活性强弱顺序为VC>CCL-M2>CCL-M3>CCL-M6(IC50依次为0.309、1.240、1.489、1.713 mg/mL),对·OH的清除活性强弱顺序为VC>CCL-M2>CCL-M6>CCL-M3(IC50依次为0.968、1.032、1.233、1.356 mg/mL),对O2-·的清除活性强弱顺序为VC>CCL-M2>CCL-M3>CCL-M6(IC50依次为0.335、0.379、0.812、1.662 mg/mL).结论:从黄瓜子中分离得到3种吡喃糖形式的均一多糖均具有一定的体外抗氧化活性,其中以CCL-M2的活性最强.