LC-MS/MS法测定犬血浆中阿莫西林的浓度及其药动学研究

摘要

目的:建立测定犬血浆中阿莫西林浓度的方法,研究其药动学特征.方法:取12只比格犬,灌胃阿莫西林胶囊250 mg,分别于给药前和给药后0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、8、10 h取血1.0～1.5 mL,以阿莫西林-d4为内标,血浆样品经酸性乙腈沉淀后,采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定其中阿莫西林的血药浓度.色谱条件为色谱柱Waters Atlantis dC18,流动相乙腈(含0.1％甲酸)-10 mmol/L甲酸铵水溶液(pH 4.5),采用梯度洗脱的方式,流速0.3 mL/min,柱温30℃,进样量1μL;质谱条件为电喷雾离子源,正离子模式,扫描方式为多反应监测,离子源喷雾电压5.5 kV,离子源温度450℃,雾化气压力30 psi,加热气压力40 psi,阿莫西林离子对m/z 366.2→113.9,内标离子对m/z 370.2→353.0,二者碎裂电压分别为26、16 V,驻留时间均为200 ms.结果:阿莫西林检测质量浓度在0.1～16μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9982),日内、日间精密度的RSD分别小于14.3％、11.8％(n=5),准确度为93.0％～112.0％(n=3);提取回收率为58.9％～63.3％(RSD=3.3％,n=3),基质效应为2.8％(n=6),稳定性试验的RSD均小于15％(n=3).阿莫西林在犬体内的药动学符合一室模型,t1/2为1.56 h、10 h内的药-时曲线下面积(AUC0-10 h)为24300 ng·h/mL、cmax为7523 ng/mL.结论:该方法灵敏、准确、简便、快速,可用于犬血浆中阿莫西林的血药浓度测定及药动学的研究.