黄芪多糖缓释纤维对成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响

摘要

目的:研究黄芪多糖(AP)缓释纤维对成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响.方法:将AP分别与左旋聚乳酸(PLLA)结合制备成AP质量浓度分别为0、25、50、100μg/ml的静电纺丝缓释纤维,即PLLA、PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3,以异硫氰酸荧光素为指示剂于荧光显微镜下观察MC3T3-E1细胞在上述4种缓释纤维上的黏附情况;采用紫外分光光度法在490 nm波长处测定PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3中AP的含量,考察其21d内的体外释放情况;采用MTT法检测4种缓释纤维作用24、48、72 h时MC3T3-E1细胞的增殖情况;采用酶标仪法检测4种缓释纤维对MC3T3-E1细胞作用3、5、7d时的碱性磷酸酶(ALP)活性表达情况.结果:镜下观察PLLA纤维连续,较多空隙,表面光滑;PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3纤维呈纵横交错的三维、多空网络结构,且3种AP载药量下纤维形态未见明显改变.PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3能持续释放AP21 d,且最初的24h内释药呈突释状态.与PLLA比较,PLLA/AP2、PLLA/AP3能促进MC3T3-E1细胞的增殖,PLLA/AP1仅作用48 h时能促进MC3T3-E1细胞的增殖,差异具有统计学意义(P＜0.05);PLLA/AP1、PLLA/AP2、PLLA/AP3均能增强MC3T3-E1细胞中ALP活性表达,差异具有统计学意义(P＜0.05),且与AP浓度呈正相关.结论:AP缓释纤维具有一定的缓释作用,且对MC3T3-E1细胞的增殖、分化具有剂量依赖性的促进作用.