漏芦乙醇提取物抑制E2F1的表达调控甲状腺癌细胞的生物行为

摘要

目的:研究漏芦乙醇提取物调控E2F1的表达对甲状腺癌细胞活性、凋亡、迁移、侵袭的影响.方法:采用50,100,150μg·ml-1浓度的漏芦提取物处理甲状腺癌细胞SW579,噻唑蓝(MTT)和细胞克隆实验检测细胞活性与克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭,蛋白质印迹法(Western blot)检测P21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、转录因子E2F1蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测E2F1 mRNA表达.在SW579细胞中转染pcDNA3.1-E2F1,并使用漏芦提取物处理,观察过表达E2F1对漏芦提取物作用的细胞活性、凋亡、迁移、侵袭的影响.结果:与对照组(0μg·ml-1)相比,50,100,150μg·ml-1的漏芦提取物明显减少细胞SW579的细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量、E2F1 mRNA、E2F1蛋白表达量,明显提高细胞SW579的凋亡率、P21、caspase-3、E-cadherin蛋白水平(P<0.01),均呈浓度依赖性.过表达E2F1显著增加漏芦提取物作用的细胞SW579的E2F1表达量、细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量,明显降低细胞凋亡率、P21、caspase-3、E-cadherin蛋白水平(P<0.01).结论:漏芦乙醇提取物通过下调E2F1的表达,抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡.