苦参碱促进胰高血糖素样肽1分泌与肠苦味受体途径的相关性研究

摘要

目的:研究苦味物质苦参碱促进胰高血糖素样肽1 (GLP-1)分泌与肠苦味受体途径的相关性.方法:噻唑蓝比色法(MTT)测定苦参碱对小鼠肠道内分泌细胞株(STC-1)增殖的影响;采用ELISA法检测培养基上清中的GLP-1及胞内三磷酸肌醇(IP3)含量;采用荧光分光光度仪进行Fluo-3荧光检测STC-1细胞内游离钙离子浓度;免疫印迹法(Western blot)检测磷脂酶C-β2(PLC-β2)、α-味导素蛋白(Gαgust)的表达水平.结果:苦参碱(0.2,0.5,1,5,10,15,20 mmol-L-1)可浓度和时间依赖性抑制STC-1细胞增殖,作用24,48,72 h处理后的半数抑制浓度(IC50)分另为10.32,8.37,6.58 mmol·L-1;与正常对照组比较,苦参碱中、高剂量组(6,12 mmol·L-1)可显著升高STC-1细胞内IP3含量及胞内游离钙离子的浓度(P＜0.05).苦参碱高剂量组(12 mmol·L-1)可明显升高Gαgust蛋白表达量(P＜0.05).结论:苦参碱可通过激活肠上苦味受体下游信号分子PLC-β2及αgust促进胞内IP3及钙离子浓度增加,进而刺激GLP-1分泌.