沉默胶质瘤相关癌基因同源物2基因对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响

摘要

背景与目的:胶质瘤相关癌基因同源物2(glioma-associated oncogene homolog 2,Gli2)是Hedgehog信号通路重要的转录因子,它不仅与正常细胞的生长密切相关,而且在多种肿瘤细胞中异常激活.探讨Gli2对结肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法:以Gli2干扰慢病毒载体感染SW620细胞,实验设干扰组、空病毒载体组和对照组,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测细胞中Gli2 mRNA表达和蛋白水平,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、集落形成实验和倍增时间检测细胞的增殖情况,流式细胞术(flow cytometry)检测各组细胞周期和凋亡情况,Western blot法检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax和cyclin D1蛋白水平.结果:SW620细胞转染慢病毒载体72 h后,可见明显的荧光表达;与空病毒载体组和对照组相比,干扰组细胞的Gli2基因表达被有效抑制(P<0.05);细胞增殖能力明显降低(P<0.05);细胞周期阻滞,G1期细胞比例增高(P<0.05);细胞凋亡率明显增加(P<0.05);?p-ERK1/2、Bcl-2和cyclin D1的蛋白表达量降低(P<0.05),Bax表达增加(P<0.05).结论:沉默Gli2可以明显抑制结肠癌细胞系SW620的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与p-ERK1/2、Bcl-2和cyclin D1表达的下调和Bax表达上调相关.