MSP58基因小干扰RNA对人脑神经胶质瘤细胞系U251增殖及凋亡的影响

摘要

目的:观察MSP58(58-kDa Microspherule protein，核微球蛋白58)基因特异性siRNA(small interfering RNA)对神经胶质瘤U251细胞的体外增殖和凋亡的影响。rn 方法:体外化学合成针对MSP58基因的siRNA，脂质体法转染神经胶质瘤细胞系U251，荧光显微镜观察转染效率，逆转录酶-多聚酶链反应(Reversetranscriptase-polymerase chainreaction，RT-PCR)和Western blot分别检测MSP58基因的mRNA和蛋白表达水平，四唑兰显色法(methyl thiazolyl tetrazolium assay，MTT法)绘制细胞生长曲线，流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和细胞凋亡。rn 结果:MSP58基因的特异性siRNA转染U251细胞后，MSP58的mRNA和蛋白表达水平明显降低，细胞增殖受到明显抑制;流式绌胞仪检测显示转染后的U251细胞G2／M期细胞明显减少(P<0.01)，S期细胞略有减少，G1期细胞明显增加(P<0.01)，G1期发生明显阻滞;细胞凋亡无明显变化，未出现凋亡。rn 结论:MSP58基因的特异性siRNA可明显抑制神经胶质瘤细胞U251的增殖，并引起G1期细胞阻滞，但对细胞凋亡没有明显影响。