三氧化二砷联合环腺苷酸拟似物诱导骨髓瘤细胞凋亡的实验研究

摘要

背景与目的:近年来随着新型药物和免疫疗法的成功应用,多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者的缓解率、缓解深度和无病生存率较以往显著提高,然而仍有相当一部分MM患者属于复发/难治性病例.我们的前期研究发现,环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)拟似物和三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)可以抑制MM细胞增殖并诱导其凋亡,成为MM治疗的新途径.该研究进一步探究As2O3单独和联合环腺苷酸拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸[8-(4-chlorophenylthio) adenosine 3’,5’-cyclic monophosphate,8-CPT-cAMP]对MM细胞的影响及可能作用机制.方法:以不同浓度As2O3和8-CPT-cAMP单独和联合处理MM细胞系U266细胞,采用细胞计数试剂盒(cellcounting kit-8,CCK-8)检测其增殖,应用药物联合指数(combination index,CI)分析两药是否存在协同效应,同时采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率,进一步利用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白caspase-3和Bcl-2表达的变化.结果:U266细胞经As,O3和8-CPT-cAMP单独或联合处理72和120 h后,联合用药组细胞增殖抑制率分别为(18.01±0.13)％和(28.01±0.14)％,明显高于单独用药组[As2O3组为(11.35±0.01)％和(16.01±0.14)％,8-CPT-cAMP组为(12.26±0.30)％和(15.43±0.23)％,P均＜0.05];但两药联合处理U266细胞的CI值均大于1.联合用药组72和120 h后U266细胞凋亡率分别达到(22.26±0.13)％和(31.03±0.14)％,显著高于单药组[As2O3组为(10.06±0.01)％和(12.35±0.14)％,8-CPT-cAMP组为(13.26±0.30)％和(18.76±0.23)％,P均＜0.05].同时联合用药组U266细胞内caspase-3蛋白剪切活化和Bcl-2表达下降.结论:As2O3联合8-CPT-cAMP对MM细胞凋亡诱导效应强于单药,但无协同效应.