洛铂体外诱导人结肠癌细胞株LOVO细胞凋亡及其作用机制的研究

摘要

背景与目的:化疗是结肠癌主要的治疗手段,含铂类药物的联合化疗方案延长了患者的生存期,但不良反应却很明显,尤其是奥沙利铂所致的外周神经病变较常见,并且FOLFOX4方案还容易引起耐药,因此有必要寻找一种疗效类似或优于奥沙利铂、不良反应小、对耐药肿瘤有效、水溶性好及稳定的新型铂类药物.本研究探讨洛铂体外诱导人结肠癌细胞株LOVO细胞凋亡及其作用机制,为洛铂的临床应用提供理论依据.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度(500、1000和2 000 μmol/L)的洛铂作用LOV0细胞24 h的生长抑制率;Annexin V-FITC检测法检测人结肠癌细胞株LOV0细胞凋亡的变化;Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达变化.结果:洛铂体外能抑制人结肠癌细胞株LOV0细胞的增殖,且呈剂量依赖性(P＜0.05);Annexin V-FITC检测显示,洛铂能诱导LOV0细胞凋亡,实验组的总凋亡率与对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.05),且细胞的早期凋亡呈剂量依赖性,洛铂诱导细胞凋亡的阈值为1 000 μ mol/L;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3显示,与对照组相比,实验组Bax和Caspase-3的表达明显增加,而Bcl-2的表达明显减少,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:洛铂能诱导体外培养的LOVO细胞凋亡,其作用机制可能是抑制LOVO细胞Bcl-2表达,激活Bax表达.洛铂介导的凋亡途径可能与线粒体通路Bcl-2(bax)-Caspase信号传导有关.