构建PDCD5基因真核表达载体及电转染BGC823细胞的研究

摘要

目的 构建PDCD5基因真核表达载体,并电转染BGC823细胞,获得稳定转染细胞.方法 设计合成PDCD5基因片段,将其插入经EcoR I和Xho I双酶切的pcDNA3.1+表达载体,菌落PCR和基因测序进行鉴定.重组质粒电转染BGC823细胞,G418筛选数周后PCR鉴定稳定转染细胞.结果 重组质粒经菌落PCR测序分析表明,PDCD5基因序列准确插入预期位置,且序列正确.重组质粒成功电转染BGC823细胞,并整合入细胞基因组DNA.结论 成功构建了PDCD5基因真核表达载体,并整合进BGC823细胞基因组,为研究PDCD5基因的功能及胃癌的基因治疗提供实验基础.