多药耐药基因转染的CIK细胞耐药性研究

摘要

目的:将多药耐药基因(mdr1)转入CIK细胞,观察转染前后其对顺铂的耐药性及对Lewis肺癌细胞杀伤活性的影响.方法:常规方法培养CIK细胞,在细胞对数生长期,将mdr1的重组质粒转染CIK,通过RT-PCR鉴定耐药基因表达;MTT法检测CIK细胞对顺铂敏感性的变化,同时检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性变化;Western blot检测细胞中mdr1编码的P-gP蛋白表达的变化;通过计算瘤重抑制率(TWI)检测转染前后CIK细胞对Lewis肺癌移植瘤的抑制作用.结果:转染mdr1后的CIK细胞mdr1 mRNA阳性,在转染后的CIK细胞中,P-gp 的表达较转染前CIK细胞及转染空质粒的CIK细胞明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05),转染mdr1基因后的CIK细胞对顺铂的耐药性明显提高,转染前后CIK细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性无明显变化(P＞0.05).结论:将mdr1基因转入CIK细胞后,细胞获得了多药耐药性,同时保持了原有的对肿瘤细胞的杀伤活性.