人类成熟型TGF-β1真核表达载体的构建及表达

摘要

目的:构建人类成熟型TGF-β1的真核表达载体,转染成纤维细胞进行表达,为其在基因治疗中的应用提供实验依据.方法:TRIzol法抽提人新鲜胎盘组织的总RNA,RT-PCR法扩增人成熟型TGF-β1基因,构建真核重组载体plRES2-EGFP-hTGF-β1,并采用脂质体介导法转染成纤维细胞.结果:从人新鲜胎盘组织中成功提取得到含有hTGF-β1基因的总RNA.重组载体pIRES2-EGFP-hTGF-β1转染成纤维细胞后,经荧光显微镜观察可见绿色荧光.结论:成功构建了人成熟型TGF-β1基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-hTGF-β1,转染成纤维细胞株后hTGF-β1获得成功表达.