全反式维甲酸对宫颈癌耐药细胞株HeLa/MMC侵袭、转移能力的影响及其分子机制研究

摘要

目的 观察全反式维甲酸(ATRA)对宫颈癌耐药细胞株HeLa/MMC侵袭、转移能力的影响,并探讨其分子机制.方法 分别用不同浓度ATRA(1×10-7、1×10-6、1×10-5 mol/L)处理对数生长期HeLa/MMC细胞,以Transwell小室检测细胞侵袭、转移能力的变化;采用CCK-8法检测经1×10-7、5×10-7、1×10-6、5×10-6、1×10-5 mol/L ATRA处理后的细胞增殖情况;通过流式细胞仪观察1×10-6 mol/LATRA处理HeLa/MMC细胞3、7d后细胞周期的变化;半定量RT-PCR检测1×10-6 mol/L ATRA处理HeLa/MMC细胞3、7d后细胞c-myc mRNA水平变化.结果 ①Transwell小室结果显示,1×10-7 mol/LATRA组、1×10-6 mol/L ATRA组、1×10-5 mol/L ATRA组细胞侵袭数、转移数[(40±6)、(73±7)个,(26±4)、(61±4)个,(16±3)、(49±5)个)]均减少,与对照组[(63±9)、(89±9)个]比较,差异有统计学意义(P＜0.05).②CCK-8法检测细胞增殖结果显示,随着全反式维甲酸药物浓度的递增,HeLa/MMC细胞增殖逐渐被抑制;实验各组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).③流式细胞仪检测结果显示,全反式维甲酸使进入S期耐药细胞数减少.1×10-6mol/LATRA处理3、7dS期细胞比例分别为(14.90±0.21)％、(6.48±0.18)％;两个实验组与对照组(16.28±0.12)％比较,差异有统计学意义(P＜0.05).④RT-PCR结果显示,全反式维甲酸下调癌基因c-myc的转录.1×10-6 mol/L ATRA处理3、7 d c-myc mRNA相对表达量分别为(0.5406±0.0011)、(0.4312±0.0009);两个实验组与对照组(0.6804±0.0012)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 全反式维甲酸可抑制宫颈癌耐药细胞株的侵袭、转移,其机制可能通过下调癌基因c-myc转录实现.