一种快速筛选基因转染阳性细胞的标志基因-GFP

摘要

目的:寻求基因转移中快速检测转染阳性细胞的方法.方法:采用逆转录病毒介导的基因方法,将Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因及抗新霉素(NeoR)基因插入人外周血单个核细胞(PBMNC),利用GFP在细胞内的表达所产生的绿色荧光,经流式细胞仪测定基因转移效率.结果:被转染细胞以T淋巴细胞为主,占¨.39%,而且被转化的T细胞中CD1阳性细胞转化率较高,占7.61%,CD8,CD19和CD33阳性细胞转化率分别为2.9%,2.1%和4.72%.PCR鉴定表明转染的人外周血单个核细胞中含有NeoR基因.结论:在基因转移中GFP可以为一种标记基因,快速检测转染阳性细胞.