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乙肝核心抗原为载体进行HCV治疗性疫苗的实验研究

         

摘要

目的 以乙肝核心抗原为载体进行HCV T表位的表达,并对表达产物进行免疫原性分析.方法 利用DNA重组技术将HCV T表位(131-140aa)插入HBcAg el-loop处,构建病毒颗粒样抗原表达载体pTrc-core-HCV(T),并在JM109中进行表达,蔗糖密度梯度离心提取纯化表达产物HBcAg-T,该蛋白经免疫原性检测、纯度分析及定量后,以pTrc-core表达产物HBcAg作对照免疫Balb/C鼠.适时进行抑瘤实验、HBcAb检测、流式细胞仪进行T细胞分类,以观察HBcAg-T的免疫原性.结果 抑瘤实验中HBcAg-T免疫组小鼠仅形成一个瘤块,数量和大小均低于对照组,ELISA结果显示HBcAg-T免疫组HBcAb滴度相似于HBcAg免疫组,流式散点图显示HBcAg-T免疫组CD8+T细胞所占比例明显增高.结论 HBcAg-T诱导出高水平的细胞免疫应答,可作为HCV治疗性疫苗的候选.该实验为HCV治疗性疫苗的成功研制奠定了基础.

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