转染CD258-Fc基因抑制人膀胱移行细胞癌T24细胞增殖的体内外实验研究

摘要

目的 探讨转染CD258-Fc基因抑制人膀胱移行细胞癌T24细胞增殖的作用及对人膀胱移行细胞癌动物模型抑瘤率的影响,以探讨CD258-Fc基因转染实现抗肿瘤的作用,为人膀胱移行细胞癌的基因治疗提供新思路.方法 以LipofectaminTM脂质体介导CD258-Fc基因转染人膀胱移行细胞癌T24细胞株,通过绘制细胞生长曲线、MTT比色法以及流式细胞仪检测观察CD258-Fc转染对T24细胞增殖的影响,PCR、Northern分析检测转染CD258-Fc基因在T24细胞的表达,WesternBlot检测蛋白表达,T24细胞接种于裸鼠,分组给予CD258-Fc基因转染进行治疗,评价其抑瘤率.结果 CD258-Fc基因的表达可以抑制T24细胞的体外生长,T24/CD258-Fc细胞的生长曲线较对照组明显降低;MTT比色显示T24/CD258-Fc的细胞活力与对照组相比有显著性差异(P＜0.05);PCR及Northern分析提示CD258-Fc基因转染后在T24细胞上调表达,WesternBlot检测到蛋白高表达;流式细胞仪检测显示基因转染使瘤细胞的生长滞留在G0+G1期,S期细胞明显减少,并观察到细胞凋亡.动物实验T24/CD258-Fc、T24/CD258-Fc+IFN-γ肿瘤抑制率可达48.66%和60.98%,显著高于对照组(P＜0.05),且两组间差异具有统计学意义(P=0.032).结论 CD258-Fc基因转染对T24细胞具有体内外抗肿瘤的作用,提示CD258-Fc基因转染T24细胞技术有可能为人BTCC的基因治疗提供一种新的治疗策略与手段.