人脐静脉内皮细胞的体外改良分离、培养及鉴定

摘要

目的 建立一种改良的血管内皮细胞培养方案,为体外培养血管内皮细胞提供稳定而有效的实验方法.方法 在无菌条件下,应用输液延长管置入脐带并注入2/3容积的0.1%Ⅱ型胶原酶消化、分离人脐静脉内皮细胞.用倒置相差显微镜观察细胞生长,免疫细胞化学法鉴定培养细胞.结果 原代培养的细胞30min开始贴壁生长,24-48h生长最快,3～5d呈铺路石样排列.免疫细胞化学可见培养细胞胞浆中人Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应,证实培养的细胞为血管内皮细胞,且纯度达97.5%.结论 用本实验中的方法消化、分离血管内皮细胞可获得高纯度的内皮细胞,细胞数量多、污染少且成活率高.