人Neuritin真核表达载体的构建及其在细胞中的定位

摘要

目的 获得人突触生长素Neuritin基因并构建pEGFP-C1 -neuritin真核表达载体,观察Neuritin在人AD293细胞中的定位.方法 利用PCR获得Neuritin基因,然后克隆到pEGFP-C1载体中,利用脂质体将构建的表达载体转染AD293细胞,荧光观察融合蛋白的表达.结果 从人类cDNA文库中得到Neuritin的完整开放阅读框序列,将其重组到pEGFP-C1载体中并转染AD293细胞,荧光显示Neuritin蛋白定位在细胞浆中.结论 成功构建Neuritin真核表达载体并在人AD293细胞表达,证明Neuritin蛋白定位于细胞浆,为进一步研究Neuritin与其他蛋白的相互作,探讨Neuritin功能及作用机制奠定理论基础.