天麻素对高糖条件下RF/6A细胞SIRT1/TLR4信号通路及细胞增殖与凋亡的影响

摘要

目的 探究天麻素对高糖诱导的RF/6A细胞增殖、迁移、凋亡及SIRT1/TLR4表达水平的影响.方法 将RF/6A细胞随机分5组:正常对照组(NC组),正常培养,不做任何处理;高糖对照组(HG组),在高糖环境下诱导、培养;低浓度组(LC组),在高糖环境下培养,并用5μmol/L天麻素预处理;中浓度组(MC组),在高糖环境下培养,并用10μmol/L天麻素预处理;高浓度组(HC组),在高糖环境下培养,并用20μmol/L天麻素预处理.通过CCK-8法、TUNEL法、细胞划痕法、Western blot法、qRT-PCR法等方法分析检测5组细胞增殖情况、迁移能力、凋亡、SIRT1/TLR4的蛋白含量及mRNA的表达含量的差异性.结果 (1)细胞增殖:与NC组比较,HG组细胞OD值降低(t=5.394,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞OD值依次增高(t LC=4.638,t MC=4.938,t HC=8.389,均P=0.000),差异均有统计学意义.(2)细胞凋亡:与NC组比较,HG组细胞凋亡数量升高(t=12.690,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞凋亡数量依次降低(t LC=4.713,t MC=7.588,t HC=10.050,均P=0.000),差异均有统计学意义.(3)细胞迁移:与NC组比较,HG组细胞迁移数量降低(t=23.100,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞迁移数量依次升高(t LC=5.040,t MC=11.280,t HC=15.550,均P=0.000),差异均有统计学意义.(4)SIRT1蛋白含量:与NC组比较,HG组细胞含量降低(t=6.606,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞SIRT1蛋白含量依次升高(t LC=2.195,P=0.043;t MC=3.808,P=0.002;t HC=5.556,P=0.000),差异均有统计学意义.(5)TLR4蛋白含量:与NC组比较,HG组细胞含量升高(t=6.746,P=0.000);与HG组比较,LC组、MC组、HC组细胞含量依次降低(t LC=2.141,P=0.048;t MC=4.427,P=0.000;t HC=5.321,P=0.000),差异均有统计学意义.结论 高糖条件下可诱导RF/6A细胞凋亡,天麻素能够抑制高糖诱导的RF/6A细胞凋亡,其机制可能与上调SIRT1表达、抑制TLR4信号通路等有关.