褪黑素对高糖条件下培养的大鼠系膜细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响

摘要

目的: 探讨褪黑素(Melatonin,MT)对于高糖条件下培养的大鼠肾小球系膜细胞（Mesangial cell,MC）增殖、凋亡和细胞周期的影响。
　　 方法: 透射电镜观察大鼠肾小球系膜细胞凋亡的形态学变化；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖；流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率；逆转录-聚合酶联扩增法(RT-PCR)、免疫细胞化学结合计算机图文分析系统检测凋亡相关蛋白细胞色素C（cytochrome C,Cyt-C）、Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达改变。
　　 结果: 电镜观察系膜细胞凋亡形态学变化，结果显示与高糖组相比褪黑素处理组凋亡形态表现不明显；结合MTT与细胞周期结果分析显示，褪黑素不能促进大鼠系膜细胞增殖，但对其有保护作用；流式细胞仪表明褪黑素对于30mmol/L浓度的葡萄糖诱导的肾小球系膜细胞高凋亡率有明显的抑制作用(P<0.05)，呈剂量依赖性趋势；RT-PCR、免疫细胞化学提示褪黑素能明显抑制Cyt-C和Caspase-3的表达，降低Bax/Bcl-2比值。
　　 结论: 褪黑素对高糖培养下的大鼠肾小球系膜细胞有保护作用，具体机制尚待进一步研究阐明；褪黑素可以通过抑制凋亡的线粒体途径来降低高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞高凋亡率。