β－环状糊精葡萄糖基转移酶发酵染菌的 分离和16srDNA分析

摘要

目的：解决β-环状糊精葡萄糖基转移酶发酵生产过程中频繁出现的不明原因的酶活降低问题。方法：我们采用特异性酚酞筛选培养基对发酵异常的发酵液进行菌种分离，对分离得到的菌株进行16srDNA基因序列分析，同时研究他们的发酵过程中光密度、酸碱、酶活指标。结果：分离得到了一株可以在碱性条件下与正常生产菌共生的芽孢杆菌。经过对发酵过程进行研究，在不同的发酵时期中该菌的光密度的变化和正常生产菌有明显差异，最终酶活仅为正常菌的1/6。通过对16srDNA基因序列进行分析，确定其为芽孢杆菌，和正常生产菌基因相似度达到93.81％。结论：在生产中采用16srDNA基因序列分析，可以排除染杂的的生产菌种。只要严格控制发酵出发菌株和严格保证发酵环境的纯培养条件，可以防止染菌的发生。