在大肠杆菌中表达的肺炎支原体重组蛋白的克隆及纯化

摘要

猪肺炎支原体,又称猪气喘病病原体,是全球养猪业的重要病原体,接种疫苗是控制和预防该病最有效的方法。然而,由于缺乏已知和定性的物种特异性肺炎支原体抗原,其致病机制、血清学常用检测方法及新的重组亚单位疫苗的研究进展缓慢。本试验选择了54个候选基因(在诊断试验中,这些基因的编码蛋白可用作疫苗或抗原),对其进行PCR扩增后,产物克隆至大肠杆菌表达载体中,并分析了重组蛋白的表达、溶解度及产量。结果表明,大多数重组蛋白在包涵体内表达。经尿素或十二烷基肌氨酸溶解后,用镍离子亲和层析纯化重组蛋白,得到30种重组肺炎支原体蛋白,在诊断试验中这些蛋白可用作候选疫苗和抗原。