生长抑素和皮质抑素双表达DNA疫苗免疫杂交水牛犊牛的促生长效果研究

摘要

试验旨在探究生长抑素(SS)和皮质抑素(CST)双表达DNA疫苗免疫杂交水牛犊牛的促生长效果及疫苗本身的安全性.将鉴定正确的pVGS/2SS-2A-S/CST-asd质粒电转入减毒猪霍乱沙门氏菌C500构建SS和CST双表达活载体疫苗,喷鼻免疫杂交水牛犊牛后观察其对犊牛生长性能的影响.选取体重相近的2～6月龄杂交水牛犊公牛24头,随机分为低(TL)、中(TM)、高(TH)剂量组和PBS对照组(NC),每组6头,初次免疫(简称初免)持续3 d,间隔2周后用相同剂量加免一次.结果显示,初免后2周便可产生抗SS和CST抗体,以TL组最佳,表现为更高的抗体水平和阳性率,7周时各试验组阳性率呈下降趋势;TL和TM组的平均日增重在初免后2和7周均高于对照组,但各组间差异均不显著(P＞0.05),而抗体阳性组(P)的平均日增重在0～2周显著高于阴性组(N)(P＜0.05).相关激素的检测结果显示,在初免后2和7周,试验组生长激素(GH)和胰岛素生长因子1(IGF-1)的水平均高于对照组,且以TL组表现最佳,除初免后7周GH与对照组无显著差异外,其余均极显著高于对照组(P＜0.01);初免后2周抗体阳性组极显著高于阴性组(P＜0.05).细胞因子检测结果显示,在初免后2周,试验组白细胞介素4(IL-4)含量高于对照组,且TL和TM组均极显著高于对照组(P＜0.01),尤以TL组最高,免疫后7周TL和TH组均显著高于对照组(P＜0.05),而免疫后2周对照组免疫干扰因子γ(IMF-γ)含量极显著高于试验组(P＜0.01),免疫后7周对照组INF-γ含量显著低于TL和TH组(P＜0.05);阳性组IL-4水平在免疫后2周、INF-γ水平在免疫后7周均显著高于阴性组(P＜0.05),其他各组间差异不显著(P＞0.05).对血清中血糖(GLU)、总蛋白(TP)、总胆固醇(CH)和尿素氮(BUN)水平进行测定发现,除免疫后2周总蛋白含量TL组显著高于对照组外(P＜0.05),其他指标各组间差异均不显著(P＞0.05).对免疫后的水样、土样和粪样进行目的基因扩增发现,在PCR灵敏度范围内均未检测到,证实了疫苗的安全性.由上述结果可知,疫苗免疫后能取得良好的免疫效果,使机体产生显著的免疫应答,以低剂量组效果最佳,且没有对环境产生不良影响.