水牛瘤胃Methanomassiliicoccales富集培养条件研究

摘要

试验旨在对来源于水牛瘤胃的Methanomassiliicoccales富集培养条件进行探索,在BRN培养基中分别添加甲醇、一甲胺、二甲胺和三甲胺连续传代培养,利用气相色谱、实时荧光定量PCR和16S rRNA高通量测序,对甲烷产量、Methanomassiliicoccales数量、总甲烷菌数量和甲烷菌多样性指数进行测定.结果 表明,三甲胺组甲烷平均产气量显著高于其他组(P＜0.05);与对照组相比富集第1代添加甲醇和三甲胺组Methanomassiliicoccales、总甲烷菌拷贝数显著升高(P＜0.05);第7代添加三甲胺组Methanomassiliicoccales、总甲烷菌拷贝数显著高于对照、一甲胺组、二甲胺组(P＜0.05);第23代仅有添加三甲胺组和二甲胺组检测到Methanomassiliicoccales,且三甲胺组总甲烷菌拷贝数显著高于其他组(P＜0.05);Alpha多样性分析表明,与对照组相比第7代添加三甲胺组Ace、Chao1指数显著升高(P＜0.05).甲烷菌目水平分析表明,对照组、二甲胺组、三甲胺组Methanomassiliicoccales相对丰度均超过90％.由此可见Methanomassiliicoccales富集传代培养中添加三甲胺能提高甲烷产量以及Methanomassiliicoccale拷贝数和相对丰度.