传染性法氏囊病病毒VP2基因在昆虫细胞中的表达

摘要

本研究将鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(very virulent infectious bursal disease virus,vvIBDV)JM-1/10株VP2基因克隆至pcDNA-3.1(+)启动子CMV之后,随后将CMV-VP2基因序列一同克隆人杆状病毒表达系统的质粒pFastBacTMDaul中构建了pFast-CMV-VP2.将pFast-CMV-VP2转化Escherichia coli DH10Bac感受态细胞,筛选出重组质粒BacmidCMV-VP2.用Bacmid-CMV-VP2转染Sf9昆虫细胞,获得了重组杆状病毒vBac-CMV-VP2.将该重组杆状病毒转导BHK21细胞,48～72 h后经间接免疫荧光试验(IFA)检测到VP2蛋白具有特异性荧光;样品经Western blotting分析,结果显示目的蛋白得到表达.结果表明,本试验制备的重组vBac-CMV-VP2既能在昆虫细胞中表达,也可在哺乳动物细胞中表达.