发酵透明质酸蛋白脱除方法的比较研究

摘要

以发酵的透明质酸(HA)粗品为纯化对象,以改良的咔唑法和考马斯亮蓝法为检测手段,比较了Sevage法、固定化蛋白酶-Sevage法、Sevage-CPC法、冻融-Sevage法脱除HA粗品中蛋白的效果.研究了有机相比例、振摇时间、HA粗品浓度对Sevage法脱除蛋白的影响,结果表明,Sevage法脱除蛋白的最优条件为:HA粗品浓度10 g·L-1、正丁醇和三氯甲烷的体积比1:4、振摇时间30 min.通过比较,发现Sevage法HA损失率低但蛋白脱除效果差;固定化蛋白酶-Sevage法蛋白脱除效果好,操作简便,适于工业化;冻融-Sevage法操作简单,蛋白脱除效果好,但成本高,适于小批量生产;Sevage-CPC法可得到最纯的HA,但成本高、工艺繁琐, CPC不能回收,有待于进一步的研究.