尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ的稀土离子荧光探针研究

摘要

尖吻蝮蛇毒抗凝血因子Ⅱ(ACF Ⅱ)分子中有两个钙离子结合位点,钙离子对ACFⅡ的内源荧光有增强作用,稀土离子(Nd3+,Sm3+,Eu3+,Gd3+和Tb3+)能取代ACF Ⅱ分子中的钙离子,并对ACFⅡ的内源荧光有不同程度的猝灭作用,其中Tb3+接受ACF Ⅱ分子中Trp残基传递的能量后,特征荧光增强.稀土离子与ACF Ⅱ荧光滴定表明,ACF Ⅱ分子中有两个稀土离子结合位点,稀土离子和钙离子在ACFⅡ分子中两个结合部位是共同的竞争结合部位.ACF Ⅱ与不同稀土离子之间有相近的表观结合常数K1或K2.Tb3+与RE3+(RE=Nd,Sm,Eu或Gd)间线性自由能关系表明,稀土离子与ACFⅡ结合时,没有明显的空间效应.ACF Ⅱ分子中的两个结合位点在结构上都有较大的柔性,这种结构柔性为钙离子在ACFⅡ与活化凝血因子X的结合反应中起到的促进作用提供了结构基础.