卵母细胞携带的HBV DNA在小鼠早期胚胎中的复制与表达

摘要

背景与目的:研究卵母细胞携带的乙肝病毒(HepatitisBvirus,HBV)DNA能否在小鼠早期胚胎中复制与表达,为HBV经卵垂直传播提供科学证据。材料与方法:手术暴露昆明小鼠卵巢,将pBR322_HBV重组质粒DNA注射到昆明小鼠卵巢内,1个动情周期(4d)后进行超排卵并与正常雄性小鼠合笼,收集二细胞胚,用荧光原位杂交(Fluorescenceinsituhybridization,FISH)检测HBV在早期胚胎内的整合和复制;用逆转录聚含酶链反应(Reversetranscriptase_polymerasechainreaction,RT_PCR)和免疫荧光试验检测HBV基因在早期胚胎的表达。结果:FISH在小鼠二细胞胚细胞核上检测到HBVDNA阳性杂交信号,RT_PCR和免疫荧光试验在二细胞胚内检测到HBxmRNA和HBsAg。结论:HBVDNA进入雌性生殖细胞后,可以整合到宿主基因组内,通过自然受精随卵母细胞进入胚胎,并能在胚胎中复制与表达。提示HBV有可能通过雌性生殖细胞进行垂直传递。