甘蓝型油菜BnNF-YA1的克隆和功能鉴定

摘要

NF-YA是组成NF-Y转录因子的3个亚基之一,在植物中参与生长发育、胁迫响应以及与微生物互作等重要生物过程。通过克隆BnNF-YA1,并对BnNF-YA1进行生物信息学分析和表达模式分析,分离克隆其编码序列,构建过表达载体,转化甘蓝型油菜,通过阳性鉴定获得BnNF-YA1的转基因阳性植株,并对过表达BnNF-YA1的转基因植株进行了逆境表型鉴定。结果表明,BnNF-YA1的开放读码框为858 bp,编码285个氨基酸;烟草瞬时表达分析发现BnNF-YA1蛋白定位于细胞核内;酵母生化分析表明BnNF-YA1全长蛋白没有转录激活活性;表达分析结果显示,BnNF-YA1受PEG处理诱导表达,且在幼叶、花苞和受精后20 d的角果中表达水平较高;过表达BnNF-YA1的甘蓝型油菜对PEG和MV处理的耐受性提高,表明BnNF-YA1可能参与调控甘蓝型油菜对渗透胁迫和氧化胁迫的响应。