兔转基因单细胞克隆株的分离培养及其染色体倍性分析

摘要

为检测原代二倍体细胞转基因后单细胞克隆的增殖能力及其染色体倍性稳定性,用脂质体介导的转染方法将质粒DNA pEGFP-C1(带有报告基因GFP和NEOr)导入体外培养的兔胎儿成纤维细胞中,经G418药物筛选后,分离出73个GFP阳性细胞克隆,最后存活13个(18%),对其中9个克隆的染色体倍性进行分析,结果只有2个(22%)克隆的染色体倍性正常率在75%以上,分别为80%和75%,其余7个克隆的染色体倍性正常率均在70%以下.这表明,当使用转基因单细胞克隆株作为供核细胞生产克隆动物时,单细胞克隆的增殖代数和染色体倍性的稳定性需要进一步研究提高.