小菜蛾颗粒体病毒PP31蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

摘要

杆状病毒PP31是一种磷酸化的DNA结合蛋白.pp31基因存在于所有已完成测序的鳞翅目昆虫杆状病毒.用PCR方法从小菜蛾颗粒体病毒基因组扩增pp31基因,将其克隆至原核表达载体pET28a,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株.经IPTG诱导,在被转化菌株中表达产生出携带6×His标签的PP31蛋白.用ProBondTM树脂纯化的His-PP31融合蛋白大小约29kD左右.用该融合蛋白免疫新西兰大白兔,获得PlxyGV PP31蛋白抗血清.Western blot分析显示,所获得的抗血清具有较强的特异性和高效价,可应用于PlxyGV PP31蛋白分析.