裂谷热假病毒颗粒研制及鉴定

摘要

裂谷热是危害严重的人畜共患病,为了给该病的分子生物学检测提供RNA阳性质控品,制备了裂谷热假病毒颗粒并进行了检测和验证.将pGEM-T-RVF质粒与假病毒载体p-MS2质粒分别进行Pst Ⅰ和HindⅢ双酶切,然后连接构建p-MS2-RVF重组质粒.将p-MS2-RVF重组菌进行表达、酶消化及盐沉淀后纯化假病毒颗粒,在特性检测的基础上,借助荧光RT-PCR方法进行鉴定.结果表明,裂谷热假病毒颗粒耐核酸酶,室温至少保持1个月,稳定,易运输；荧光RT-PCR检测表明最低可达到4.25×102copies检测限.构建的裂谷热假病毒颗粒将为裂谷热分子生物学检测提供阳性质控物质.