肥胖基因FTO作用底物是RNA中的6-甲基腺嘌呤

摘要

RNA在众多细胞工作机制中具有调控和信息分子双重功能的作用.因此,RNA修饰的研究是生物学的一个新兴领域.据最新的RNA 修饰数据库RNAMDS中一共收集并记录了109种RNA的修饰形式,其中RNA甲基化修饰占80%,尤其是6一甲基腺嘌呤（N6-methyladenosine,m6A）,是发生在腺嘌呤A第六位N原子上的甲基化,也是真核生物RNA内部序列中最常见的一种转录后修饰形式.最新研究发现：肥胖基因FTO表达的相关蛋白可以脱掉6-甲基腺嘌呤上的甲基,而且研究表明,该甲基化过程是可逆的.激活或敲除6-甲基腺嘌呤甲基转移酶基因会引起生物体重要的表型变化,本文将通过体外模拟生理环境条件下的去甲化底物反应条件,共同孵育FTO野生型和FTO突变型的基因表达的蛋白酶分别与RNA甲基化底物作用的实验,再利用质谱与高效液的技术对多种甲基化形式予以进一步探索,来发现FTO表达蛋白对单链RNA上的6-甲基腺嘌呤具有去甲基化功能.同时,经过体内试验的验证,在FTO基因敲低细胞中mRNA中的6-甲基腺嘌呤水平升高;相反,在FTO基因过表达细胞中mRNA中的6-甲基腺嘌呤水平降低;而6-甲基腺嘌呤甲基化酶METTL3的表达均未受到影响.