光对6-甲基腺嘌呤核酸修饰调控的初步研究

摘要

表观遗传学是遗传学的重要组成部分。近些年来，核酸修饰成为表观遗传学领域的研究热点。在植物、酵母以及病毒等多个物种中发现存在丰富的核酸修饰。大多数核酸上存在广泛的化学修饰。在植物中核酸修饰具有重要的生物学功能。但在植物中，外界信号是如何调控核酸修饰的仍然不清楚，而光作为植物最重要的外界环境信号之一。因此，我们想探究光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰之间是否存在相互关系。本文对光和6-甲基腺嘌呤核酸修饰进行初步研究，结果如下：　　1、分别检测在白光和黑暗条件下的野生型(Columbia-0，Col-0)中m6A整体修饰水平。结果显示：白光条件下的野生型中检测到的m6A信号要明显强于黑暗下的野生型，说明光能够诱导m6A修饰的产生。　　2、分别检测在蓝光、红光和远红光处理下野生型和对应的突变体中m6A整体修饰水平的差异。结果显示：只有蓝光受体突变体cry1cry2与蓝光处理下的野生型中所检测到的m6A信号有显著差异，说明蓝光诱导m6A修饰的产生。　　3、对拟南芥野生型和突变体fip37-4下胚轴在不同单色光下进行表型观察。结果显示：蓝光对突变体fip37-4下胚轴伸长的抑制作用不明显。　　4、成功构建MTA-pGADT7、MTB-pGADT7、FIP37-pGADT7和ALKBH10B-pGADT7酵母双杂载体，通过酵母双杂实验，结果显示：在蓝光下蓝光受体CRY1和FIP37有相互作用。　　5、成功鉴定出Atdamt-1突变体植株，对野生型和Atdamt-1突变体进行6mA水平检测，结果显示：野生型中的6mA水平显著强于Atdamt-1突变体植株。　　6、成功诱导纯化出AtDAMT-1蛋白。　　这些初步研究结果为探究拟南芥中光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰之间的功能关系提供了线索，进一步我们将对光与6-甲基腺嘌呤核酸修饰分子机制进行研究。

目录

声明

第一章 前言

1.1 RNA甲基化

1.1.1 RNA甲基化修饰研究进展

1.1.2 m6A组成及分布

1.1.3 m6A修饰相关蛋白

1.1.4 m6A功能研究进展

1.2光受体

1.2.1光受体分类及其研究进展

1.2.2隐花色素的发现

1.2.3隐花色素介绍及类型

1.2.4隐花色素生物学功能

1.3研究的目的与意义

第二章 光与m6A修饰的关系研究

2.1引言

2.2实验材料及方法

2.2.1实验材料

2.2.2实验方法

2.3实验结果与分析

2.3.1拟南芥突变体fip37-4植株T-DNA鉴定结果与分析

2.3.2 白光与黑暗下m6A Dot Blot 结果与分析

2.3.3单色光下m6A Dot Blot结果与分析

2.3.4单色光突变体m6A Dot Blot结果与分析

2.3.5拟南芥fip37-4下胚轴表型观察结果与分析

2.3.6基因克隆与载体构建结果与分析

2.3.7 酵母双杂结果与分析

2.4本章小结

第三章 拟南芥Atdamt-1突变体初步研究

3.1前言

3.2实验材料及方法

3.2.1实验材料

3.2.2实验方法

3.3实验结果与分析

3.3.1 拟南芥和多个物种DAMT-1催化域的比对结果与分析

3.3.2 拟南芥Atdamt-1突变体植株鉴定结果与分析

3.3.3 Atdamt-1突变体6mA Dot Blot结果与分析

3.3.4 AtDAMT-1蛋白的诱导及纯化结果与分析

3.4本章小结

结论与展望

参考文献

致谢