重组耐热β-葡萄糖苷酶的固定化及其对黄酮糖苷的定向转化

摘要

为提高黄酮糖苷类化合物酶法转化的效率,降低酶使用成本,对重组耐热β-葡萄糖苷酶的固定化条件进行了研究,比较了固定化酶和游离酶的酶学性质差异,同时研究了固定化酶转化3种黄酮糖苷的时效曲线及转化效率.结果 表明:重组耐热β-葡萄糖苷酶的固定化最优条件为在pH值6.0,室温条件下,酶活力2 U/mL,海藻酸钠质量分数1.5％,氯化钙质量分数2.5％,戊二醛质量分数1.25％,颗粒硬化时间2.5h,此条件下固定化酶颗粒的酶活力为0.64 U/mg,酶固定化率可达62.5％.固定化酶较游离酶具有更优的酸碱稳定性和热稳定性,且重复使用20次后仍具有55％以上的残余酶活力.固定化酶能够高效定向转化异槲皮素、大豆苷以及淫羊藿次苷I等3种黄酮糖苷,生成活性更强的黄酮苷元槲皮素、大豆苷元和淫羊藿素,其摩尔转化率分别为99.37％、97.21％和97.93％,产率分别为0.776、1.091和0.714 g/(L·h).