PTEN与NHERF-1相互作用

摘要

目的 筛选与PTEN结合的含PDZ结构域的蛋白,并利用蛋白质组学方法对筛选出的蛋白质的相互作用予以鉴定.方法 利用PDZ蛋白质芯片筛选PTEN的结合蛋白.对所发现的PTEN与NHERF-1的相互作用,应用GST融合蛋白沉降和免疫共沉淀实验等多种方法予以鉴定.结果 发现了几种新的与PTEN结合的含PDZ结构域的蛋白质.并对PTEN/NHERF-1的相互作用进行了进一步研究,发现PTEN的羧基端可与NHERF-1的第一个PDZ结构域(PDZ1)结合.将PTEN羧基最末端的4个氨基酸(I-T-K-V)中任何一个突变为丙氨酸,都明显抑制PTEN与NHERF-1的结合.免疫共沉淀结果显示,在细胞内完整的蛋白质分子PTEN与NHERF-1也可以结合.结论 PTEN与NHERF-1之间存在相互作用,该相互作用是由PTEN的羧基末端与NHERF-1的PDZ1结构域结合而实现的,PTEN羧基最末端的4个氨基酸对于维持它们之间的结合有十分重要的作用.