人2型糖尿病皮肤角质形成细胞的无血清培养及纯化

摘要

目的 体外原代无血清培养人2型糖尿病皮肤角质形成细胞,并进行纯化.方法 采用中性蛋白酶-胰蛋白酶两步消化法分离人2型糖尿病皮肤角质形成细胞,使用无血清培养基进行原代培养,通过两步消化传代纯化细胞,使用倒置相差显微镜观察细胞生长状态,WST-8法测定细胞增殖曲线,流式细胞术检测其表型和纯度.结果 无血清培养并纯化的角质形成细胞呈典型的上皮形态,第3代角质形成细胞增殖曲线为S形,对数增长期的平均倍增时间为36.9 h,角蛋白阳性率为98.9％.结论 建立高纯度的人2型糖尿病皮肤角质形成细胞的无血清培养方法.